全硫代反义寡核苷酸对骨肉瘤细胞生长及端粒酶活性的影响
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2012年3月5日
全硫代反义寡聚脱氧核苷酸,骨肉瘤细胞HOS细胞,细胞凋亡
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崔凯 李洪秀 鞠培新 秦书俭 辽宁医学院解剖学教研室;盘锦市第二人民医院骨科;盘锦市第二人民医院普外科;盘锦市第二人民医院胸外科;
【摘要】目的采用针对人端粒酶hTR基因的反义寡聚脱氧核苷酸,探讨端粒酶反义寡聚脱氧核苷酸(ASODN)对骨肉瘤细胞HOS细胞端粒酶活性及细胞增殖的影响。方法脂质体介导的细胞转染后,PS-ASODN和PS-SODN分别作用于骨肉瘤细胞HOS细胞后并培养24、48、72h,分别采用酶联免疫吸附法(ELISA)、吖啶橙染色法检测骨肉瘤细胞HOS细胞的端粒酶活性、细胞形态改变。结果端粒酶PS-ASODN作用骨肉瘤细胞HOS细胞72h后端粒酶活性表达为阴性。PS-ASODN作用的骨肉瘤细胞HOS细胞有明显凋亡现象,凋亡细胞体积缩小,染色质浓缩。结论 PS-ASODN对端粒酶活性的抑制率与PS-ASODN的浓度和作用时间呈依赖关系,即抑制率随着反义寡核苷酸的浓度和作用时间的增加而增大。
【关键词】 全硫代反义寡聚脱氧核苷酸 骨肉瘤细胞HOS细胞 端粒酶 细胞凋亡
【分类号】R738.1
一系列迹象表明端粒酶的激活可能在肿瘤的发生发展过程中起着重要的作用[1-2]。本实验设计了一段互补于hTR模板区的反义核酸,用寡核苷酸脂质体介导,将互补于人端粒酶RNA模板区的反义寡核苷酸作用于体外培养的骨肉瘤细胞HOS细胞,采用酶联免疫吸附法等技术观察反义hTR对骨肉瘤
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