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编号:12626536
罗汉果实时荧光定量PCR内参基因的选择(4)
http://www.100md.com 2015年1月15日 中国中药杂志 2015年第2期
     本课题组通过表达量的差异找到了罗汉果甜苷V合成关键酶基因,并对这些基因进行时空表达规律研究。如CS基因在授粉后30 d几乎无表达,果实发育后期罗汉果甜苷母核葫芦二烯醇合成减少,也说明了CS是母核的限制因子,实现在后期增强CS的表达,有望提高甜苷含量。研究基因的时空表达规律是实现对其调控的基础。qRT-PCR技术具有高灵敏、高保真、高特异、高重现和高通量等特点,被广泛应用于基因表达的分析[11],是分子生物学研究中分析基因表达的重要工具。而表达谱分析为半定量,二者在结果上90%相符,但也有不符甚至矛盾。在本课题组的研究中发现,使用GAPDH作为内参时,CS基因的表达量与表达谱结果有矛盾,这可能与未使用合适的内参基因有关。因此,需选用相对表达稳定的更合适的基因作为罗汉果内参基因对这些基因进行表达量的分析。

    本研究根据罗汉果转录组数据,从中选出了6个看家基因作为候选内参基因,这些基因常作为一些植物研究的内参基因。周良云[12]等在研究黄花蒿时发现18S核糖体RNA(18SrRNA)及Actin表达最稳定 ......
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