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编号:13128722
脱落酸对铁皮石斛Ty1—copia类反转录转座子转录活性的影响(2)
http://www.100md.com 2014年5月15日 《中国中药杂志》 2014年第10期
     2.3.2 RT- PCR反应 根据GenBank中Ty1-copia类LTR反转录转座子RT基因的保守区特点,选择了Kumar等[15]针对Ty1-copia类LTR反转录转座子RT序列设计的简并引物对Ty1-F(5′-ACNGCNTTYYTNCAYGG-3′)和Ty1-R(5′-ARCATRTCRTCNACRTA-3′);内参基因为铁皮石斛Actin基因: actin-F(5′- TTGTGTTGGATTCTGGTGATGGTGT -3′)和actin-R(5′-TTTCCCGTTCTGCTGTTGTTGTGAA-3′);引物均由上海生工生物工程(上海)股份有限公司合成。

    RT-PCR反应体系(20 μL):10×Buffer 2 μL;25 mmol·L-1 Mg2 +1.2 μL;2.5 mmol·L-1 dNTPs 0.8 μL;10 μmol·L-1引物(Ty1-F和Ty1-R)0.8 μL;5 U·μL-1Taq酶0.1 μL;cDNA模板 4 μL ......
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