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编号:13481290
金银花多糖的指纹图谱及体外抗病毒活性研究(4)
http://www.100md.com 2020年5月1日 《中国药房》 20209
     细胞存活率(%)=(病变组平均OD值-空白组平均OD值)/(细胞对照组平均OD值-空白组平均OD值)×100%…①

    TCID50=Antilg[高于50%细胞病变效应(CPE)百分率病毒稀释度+比距]…②

    比距(%)=(高于50%存活率-50%)/(高于50%存活率-低于50%存活率)×100%…③

    结果,RSV的TCID50值为10-2.13,故选取RSV的100倍TCID50值作为病毒液浓度。

    2.8.4 多糖样品细胞毒性测定 取Vero细胞适量,经胰酶消化后,按1×104个/孔接种于96孔板中,培养过夜。依据前期预试验结果,将总多糖、80%醇沉多糖、50%醇沉多糖、20%醇沉多糖分别用RPMI 1640培养基从80 g/L起以2倍比连续稀释共10个梯度后,按每孔100 ?L分别转移至细胞中;同时设细胞对照组(含完全培养基100 ?L)和利巴韦林阳性对照组(用完全培养基稀释的利巴韦林药液100 ?L;依据前期预试验结果,从250 ?g/mL起以2倍比连续稀释共10个梯度)。每组设4个复孔。细胞培养24 h后,按“2.8.3”项下MTT法使用酶标仪于492 nm波长处测定各孔OD值,按公式①计算细胞存活率 ......
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