在线二维柱切换—高效液相色谱法测定人血清中多索茶碱浓度(3)
2.11 临床样本测定
取3例用药患者的全血样品，按“2.3”项下方法处理后，再按“2.1”项下色谱条件进样分析，代入回归方程计算浓度。结果显示，3例用药患者的多索茶碱血药浓度分别为3.23、3.35、3.68 ?g/mL，RSD分別为2.28%、2.34%、2.14%(n=5)，血药浓度均在本方法检测范围内，且重现性较好。
3 讨论
多索茶碱是一种新型支气管扩张药，可直接作用与支气管，促进支气管平滑肌舒张，从而达到抑制哮喘发作[6]。但其治疗范围较窄，实际使用过程中易出现肝损害、心律失常等不良反应，需对其进行血药浓度监测。已有研究报道采用HPLC法测定多索茶碱，但均存在前处理复杂、灵敏度低、色谱柱使用寿命较短等问题[5，7]。本方法采用高氯酸沉淀蛋白后直接进样，不但避免有机溶剂萃取造成样品的损失，而且不需要用微孔滤膜过滤，简化了样品处理过程，缩短了样本处理时间。此外，本方法提取回收率高，回收率稳定，不需要加入内标，通过外标法就能达到较好的线性关系。
本试验采用的在线二维柱切换-HPLC法，在普通HPLC分析柱前引入中间柱，中间柱除了对样品具有分离功效外，还具有强大的除杂功能。当目标物全部通过中间柱后，中间柱带着残留的杂质从第一维柱系统转移至第二维柱系统，通过流动相反向冲洗，大量的杂质从第二维柱系统中排入废液，这不仅去除了大部分杂质的干扰，提高了分析的准确性，而且大大延长了分析柱和中间柱的寿命，节约了检测成本。
本研究选择马血清作为血清基质，因为马血清与人血清作为质控基质无明显差异，而马血清更容易获得且已被卫生部质控中心采用，故试验中采用马血清配制的质控样品。与文献方法[5，7]比较，该方法试验步骤更为简单、检测时间短、方法线性好、干扰少、准确，适用于临床多索茶碱的血药浓度检测。
参考文献
[ 1 ] 金淑萍，高永丽，李成建.多索茶碱不良反应文献概述[J].中国药物滥用防治杂志，2015，21(6)：362-363.
[ 2 ] 汪永忠，李颖，高家荣，等.超高效液相色谱法测定人血清中多索茶碱浓度[J].中国临床药学杂志，2012，21(2)：109-112.
[ 3 ] 王金明，王石健，张晓芬，等. HPLC测定人血清中多索茶碱的浓度[J].中国现代应用药学，2014，31(8)：988-990.
[ 4 ] 洪冰，章小敏，叶爱菊. HPLC法监测人血清中茶碱类药物浓度[J].海峡药学，2015，27(1)：227-229.
[ 5 ] 王淑梅，张志清，杨秀岭，等. RP-HPLC法测定人血清中多索茶碱的浓度[J].中国药房，2011，22(34)：3209-3210.
[ 6 ] 赵红卫，王漪檬，赵宁民，等.高效液相色谱法同时测定茶碱和多索茶碱的血清药物浓度[J].中华实用诊断与治疗杂志，2014，28(11)：1095-1096.
[ 7 ] 李岑，高敬林，石蕊，等. UPLC与HPLC测定人血浆中多索茶碱的比较[J].华西药学杂志，2017，32(3)：281-283.
(收稿日期：2018-01-22 修回日期：2018-03-14)
(编辑：邹丽娟), http://www.100md.com(郑玲利 袁明勇 蒋婷 王峰 张维 陈静)
取3例用药患者的全血样品，按“2.3”项下方法处理后，再按“2.1”项下色谱条件进样分析，代入回归方程计算浓度。结果显示，3例用药患者的多索茶碱血药浓度分别为3.23、3.35、3.68 ?g/mL，RSD分別为2.28%、2.34%、2.14%(n=5)，血药浓度均在本方法检测范围内，且重现性较好。
3 讨论
多索茶碱是一种新型支气管扩张药，可直接作用与支气管，促进支气管平滑肌舒张，从而达到抑制哮喘发作[6]。但其治疗范围较窄，实际使用过程中易出现肝损害、心律失常等不良反应，需对其进行血药浓度监测。已有研究报道采用HPLC法测定多索茶碱，但均存在前处理复杂、灵敏度低、色谱柱使用寿命较短等问题[5，7]。本方法采用高氯酸沉淀蛋白后直接进样，不但避免有机溶剂萃取造成样品的损失，而且不需要用微孔滤膜过滤，简化了样品处理过程，缩短了样本处理时间。此外，本方法提取回收率高，回收率稳定，不需要加入内标，通过外标法就能达到较好的线性关系。
本试验采用的在线二维柱切换-HPLC法，在普通HPLC分析柱前引入中间柱，中间柱除了对样品具有分离功效外，还具有强大的除杂功能。当目标物全部通过中间柱后，中间柱带着残留的杂质从第一维柱系统转移至第二维柱系统，通过流动相反向冲洗，大量的杂质从第二维柱系统中排入废液，这不仅去除了大部分杂质的干扰，提高了分析的准确性，而且大大延长了分析柱和中间柱的寿命，节约了检测成本。
本研究选择马血清作为血清基质，因为马血清与人血清作为质控基质无明显差异，而马血清更容易获得且已被卫生部质控中心采用，故试验中采用马血清配制的质控样品。与文献方法[5，7]比较，该方法试验步骤更为简单、检测时间短、方法线性好、干扰少、准确，适用于临床多索茶碱的血药浓度检测。
参考文献
[ 1 ] 金淑萍，高永丽，李成建.多索茶碱不良反应文献概述[J].中国药物滥用防治杂志，2015，21(6)：362-363.
[ 2 ] 汪永忠，李颖，高家荣，等.超高效液相色谱法测定人血清中多索茶碱浓度[J].中国临床药学杂志，2012，21(2)：109-112.
[ 3 ] 王金明，王石健，张晓芬，等. HPLC测定人血清中多索茶碱的浓度[J].中国现代应用药学，2014，31(8)：988-990.
[ 4 ] 洪冰，章小敏，叶爱菊. HPLC法监测人血清中茶碱类药物浓度[J].海峡药学，2015，27(1)：227-229.
[ 5 ] 王淑梅，张志清，杨秀岭，等. RP-HPLC法测定人血清中多索茶碱的浓度[J].中国药房，2011，22(34)：3209-3210.
[ 6 ] 赵红卫，王漪檬，赵宁民，等.高效液相色谱法同时测定茶碱和多索茶碱的血清药物浓度[J].中华实用诊断与治疗杂志，2014，28(11)：1095-1096.
[ 7 ] 李岑，高敬林，石蕊，等. UPLC与HPLC测定人血浆中多索茶碱的比较[J].华西药学杂志，2017，32(3)：281-283.
(收稿日期：2018-01-22 修回日期：2018-03-14)
(编辑：邹丽娟), http://www.100md.com(郑玲利 袁明勇 蒋婷 王峰 张维 陈静)